一、 糧油谷物飼料中霉菌毒素污染情況
霉菌毒素是由產(chǎn)毒真菌在適宜的環(huán)境條件下產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物.根據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織資料,世界上約有25%的谷物不同程度地受到霉菌毒素的污染而不能食用,不僅給經(jīng)濟上造成了巨大損失,而且由真菌產(chǎn)生的霉菌毒素還能引起人畜中毒,嚴重時甚至可以引起致癌。
目前已知能產(chǎn)生霉菌毒素的真菌有150余種,產(chǎn)生的霉菌毒素約有300種,其中包括了黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮及其衍生物類毒素、嘔吐毒素、伏馬菌素、T2毒素等。真菌的生長和繁殖都需要一定的溫、濕度條件,最適宜生長溫度一般為20~30℃,霉菌繁殖產(chǎn)毒的最適溫度為25~30℃。其中曲霉菌屬最適宜生長溫度為30℃左右,青霉菌屬為25℃左右,鐮刀菌屬一般為25℃左右。當(dāng)真菌處于干燥、低溫或處于與其他真菌競爭的應(yīng)激情況時,就會產(chǎn)生霉菌毒素,由于真菌生長有一定的地域性,因此,不同區(qū)域占優(yōu)勢的霉菌毒素種類也不同,如在亞熱帶和熱帶地區(qū),農(nóng)產(chǎn)品和飼料主要被黃曲霉素和某些赭曲毒素污染;而玉米赤霉烯酮、嘔吐霉素、赭曲霉毒素A、T-2毒素、煙曲霉毒素則在溫帶地區(qū)占有顯著優(yōu)勢。
據(jù)我國糧油谷物飼料霉變情況調(diào)查報告,真菌的檢出率和含量,南方地區(qū)都大大高于北方地區(qū),特別是5~9月份,南方地區(qū)的平均氣溫都處于20℃以上,平均相對濕度在80%以上,這種高溫高濕的環(huán)境條件下,真菌生長繁殖最為旺盛,谷物飼料霉變大多發(fā)生在這個季節(jié);北方的夏季雖然溫度較高,但相對濕度較低,不易霉變,但常因加工、運輸或貯存不當(dāng)而產(chǎn)生霉菌毒素。
目前霉菌毒素的檢測方法主要分為兩大類:即確認方法和快速方法。確認方法主要基于理化儀器設(shè)備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。
結(jié)果準(zhǔn)確、法定認可是理化方法最大的優(yōu)點,但是儀器設(shè)備價格昂貴,前處理過程復(fù)雜、操作繁瑣、效率低,成本極高,因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測,一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,但也均存在各自的優(yōu)缺點:ELISA 方法能靈敏度相對較高,且能定量檢測,但操作過程相對復(fù)雜,對環(huán)境和人員要求高,環(huán)境干擾因素復(fù)雜,重復(fù)性較差;膠體金檢測卡可以滿足現(xiàn)場快速的要求,能在5-10min內(nèi)快速測定,但是只能定性,且靈敏度較低,肉眼觀察主觀性較強,重復(fù)性差。
二、 霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)
2.1糧油谷物等食品中霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)
2.2飼料及原料中霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)
三、 上海飛測糧油谷物飼料中霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測系統(tǒng)-10min準(zhǔn)確定量測定
上海飛測生物基于全球領(lǐng)先的熒光定量FPOCT技術(shù)平臺,開發(fā)了霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測系統(tǒng),該系統(tǒng)結(jié)合了膠體金快速、酶聯(lián)免疫定量以及色譜法準(zhǔn)確的特點,可在10min內(nèi)快速準(zhǔn)確定量的測定出糧油谷物飼料中的霉菌毒素,包括黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等含量,樣品前處理簡單(僅需8min),六種毒素一次提取即可,操作簡便,只需一步加樣,無需標(biāo)準(zhǔn)品,無需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù),結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場打印,準(zhǔn)確性高度符合HPLC法的檢測結(jié)果,為霉菌毒素的快速檢測和控制提供了一種全新的技術(shù)手段,適用于各類原料收儲、糧油加工企業(yè)、飼料加工企業(yè)、第三方檢測機構(gòu)及政府相關(guān)監(jiān)管部門。
3.1. 熒光定量FPOCT檢測原理
當(dāng)將樣品滴加在加樣區(qū)時,樣品中的待測物與結(jié)合墊中的熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合并通過毛細作用向前層析,當(dāng)達到檢測區(qū)后,檢測線T線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合,檢測線T線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記抗體的量與樣品中待測物的量成反比,質(zhì)控線C線結(jié)合的熒光標(biāo)記物樣品中待測物的量無關(guān),其它熒光標(biāo)記物繼續(xù)層析達到吸收區(qū)。層析結(jié)束后,采用熒光讀數(shù)儀的讀取T線和C線的熒光強度并計算T/C值,通過儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出樣品中待測物的含量。
3.2. 稀土元素銪的特點
1、稀土元素Eu的熒光強度比普通熒光染料高1-3個數(shù)量級,檢測靈敏度更高;
2、激發(fā)后的熒光壽命長達1ms,比普通熒光染料的10-50ns長得多,通過讀數(shù)儀的延遲讀數(shù)功能,消除基質(zhì)本底的干擾,檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度和精確度更高;
3、激發(fā)光和發(fā)射光的Stokes 位移寬達270nm,遠遠大于普通熒光染料的10-50nm,有效降低激發(fā)光和發(fā)射光的互相干擾,同樣可以提升檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度和精確度;
4、熒光的發(fā)射峰非常尖銳,更有利于檢測儀器對熒光信號的采集和接收,提升檢測結(jié)果的可靠性;
3.3. 熒光納米微球的包裹和修飾
采用聚苯乙烯納米微球?qū)ο⊥翢晒怆x子銪進行包裹,通過熒光預(yù)增強技術(shù),提升單個熒光離子的熒光強度。通過對包裹技術(shù)的優(yōu)化和改良,納米微球中銪離子的密度可提升到10萬個/微球,包裹完熒光離子后,在微球表面再進行葡聚糖修飾,大大提升了微球的穩(wěn)定性和對可逆環(huán)境的抗干擾性。在此基礎(chǔ)上可開發(fā)出靈敏度高于普通膠體金或有色乳膠免疫層析方法2-3個數(shù)量級的定量檢測技術(shù)。
3.4熒光納米微球的包裹和修飾熒光定量FPOCT技術(shù)平臺的優(yōu)勢
3.5熒光定量FPOCT技術(shù)平臺與其他方法學(xué)技術(shù)性能的對比
3.6上海飛測霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測試紙條性能
3.7檢測所需配套的儀器和耗材
3.8檢測操作過程
檢測操作視頻
操作過程示意圖如下:
3.9結(jié)果判讀和輸出
所有產(chǎn)品均采用便熒光免疫定量分析儀進行讀數(shù),使得檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀,避免人為的誤判。
檢測結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上,同時可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測報告,另外,開通儀器的WIFI數(shù)據(jù)上傳功能后,檢測相關(guān)數(shù)據(jù)信息將自動上傳至“食品安全溯源管理云平臺”,便于溯源及質(zhì)量管理。
3.10上海飛測霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測系統(tǒng)優(yōu)勢
? 10min快速定量:集膠體金快速檢測、酶聯(lián)免疫定量檢測、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測的特點于一身,實現(xiàn)10min內(nèi)霉菌毒素的快速準(zhǔn)確定量檢測,檢測結(jié)果可現(xiàn)場打??;
? 內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線:儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,無需檢測時再做標(biāo)準(zhǔn)曲線,既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸,保護操作人員的安全;
? 隨到隨檢:對檢測樣本量無要求,既可單個或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時檢測,并可實現(xiàn)現(xiàn)場檢測;
? 操作簡便:一次提取即可檢測所有種類的霉菌毒素,也無需對檢測樣本進行任何pH的調(diào)節(jié);
? 配置要求低:對配套的儀器設(shè)備及人員要求低,操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握;
? 遠程網(wǎng)絡(luò)支持:儀器可通過網(wǎng)絡(luò)自動進行標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取、軟件升級、問題故障診斷、質(zhì)量控制等;
? 性價比高:花膠體金試紙條的價格,獲得色譜檢測的結(jié)果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測費用;
3.11熒光免疫定量分析儀基本參數(shù)
? 型號:FD-100
? 儀器尺寸:210mm×197mm×84mm
? 觸屏尺寸:3.5英寸
? 重量:1.4kg
? 激發(fā)光源 :LED
? 激發(fā)光譜 中心波長λ0=365nm
? 接收光譜 中心波長λ1=610nm
? 接口:RS232、USB
? 打印:內(nèi)置熱敏打印機
? 數(shù)據(jù)儲存:≥10000條
? 檢測時間:8秒/個
? 檢測通量:450個/小時
? 臺內(nèi)精密度 CV≤0.5%(大于50%光強)
? 臺間精密度 CV≤1.0%(大于50%光強)
? 儀器信噪比:0.01%(1:10000)
? 帶一維碼、二維碼掃描參數(shù)輸入模塊
? 帶無線傳輸模塊
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